谷物、食用油中的黃qu霉毒素快速檢測

谷物、食用油中的黃qu霉毒素快速檢測

黃qu霉毒素 B1（Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1）是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃qu霉毒素 B1 對人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃qu霉毒素B1是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。本品的黃qu霉素B1檢測靈敏度為 5ng/ml（5ppb）。

【黃qu霉素B1檢測檢測原理】

本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過單克隆抗體競爭結(jié)合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗 AFB1 單克隆抗體。

【樣 品 制 備】
1. 谷物：任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩，準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩 5min，4000rpm 離心 1min 得上清液，將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液，再根據(jù)樣品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量，用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃qu霉毒素 B1 的zui高含量要求，請參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體：

2. 飼料（以黃qu霉素B1檢測殘留* 50ppb 計(jì)算）：任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩，準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩 5min，4000rpm 離心 1min 得上清液，將上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液，再以 2ml 的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測液。如果黃qu霉素B1檢測殘留*是 30ppb，則用 1.2ml 的稀釋液溶解；如果殘留*是 40ppb，則用 1.6ml 的稀釋液溶解。

3. 食用油：稱 2.0g 油樣于小燒杯中，用 8ml 正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水充分振蕩 3min，吸去上層正乙烷層，再加入4ml 的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩 5min，靜置或 3000rpm 離心得上清液，將上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干，再用稀釋液溶解后為樣品提取液。

4. 醬油、醋、發(fā)酵酒：稱取 25.0g 樣品于小燒杯中，用 5ml 蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，加入 20ml 三lv甲烷，加塞輕輕振搖 3min，靜置分層。放出下層三lv甲烷層，經(jīng)盛有約 5g 預(yù)先用三lv甲烷濕潤的無水 Na2SO4 過濾器于蒸發(fā)皿中，后用少量三lv甲烷洗滌過濾器，洗液并于蒸發(fā)皿中，用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后，準(zhǔn)確加入稀釋液，將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。

【黃qu霉素B1檢測步驟】
1. 在進(jìn)行黃qu霉素B1檢測前先完整閱讀使用說明書，使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫；

2. 從原包裝袋中取出試紙卡，打開后平放在桌面上，請?jiān)?1 小時(shí)內(nèi)盡快使用；

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液，滴加 3 滴于加樣孔中，加樣后開始計(jì)時(shí)；

4. 結(jié)果應(yīng)在 10min 內(nèi)讀取，超過 12min 的時(shí)間判讀無效。

【黃qu霉素B1檢測結(jié)果判定】

1. 陽性：位置 C 顯示出紅色線條，而位置 T 不顯色時(shí)，或者位置 C 顯示出紅色線條，位置 T 顯示顏色非常模糊時(shí)，判為陽性。陽性結(jié)果表明：AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性：位置 C 顯示出紅色線條，位置 T 同時(shí)顯示出紅色線條，且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時(shí)，判為陰性。陰性結(jié)果表明：AFB1 含量低于樣品允許量。

3. 無效：位置 C 不顯示出紅色線條，而位置 T 顯示出紅色線條，該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。

【黃qu霉素B1檢測注意事項(xiàng)】

1. 請按照操作步驟進(jìn)行黃qu霉素B1檢測，操作時(shí)請勿觸摸試紙顯示區(qū)。

2. 如購買時(shí)發(fā)現(xiàn)過期，破損，污染，無效的產(chǎn)品，請到購買處進(jìn)行更換。

3. 黃qu霉素B1檢測試紙卡為一次性產(chǎn)品，請勿重復(fù)使用。

4. 如遇稀釋液不足，請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。

5. 本品為篩選試劑，任何陽性結(jié)果請用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。

6. 有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用 AFB1 標(biāo)準(zhǔn)品測試后作為判斷參考。

【儲藏條件與有效期】
本品應(yīng)保存在干燥陰涼處（4--30℃），有效期 18 個(gè)月。